Detection of Dirofilaria immitis using microscopic, serological and molecular techniques among dogs in Cabo Frio, RJ, Brazil / Detecção de Dirofilaria immitis utilizando técnicas microscópicas, imunológicas e moleculares em cães de Cabo Frio, RJ

Abstract Heartworm disease is a health problem for dogs and cats, especially in tropical and subtropical coastal regions of the world. Some studies have compared the efficacy of the diagnostic techniques used to detect this parasitosis. Therefore, the aim of this study was to compare parasitological optical microscopy (POM), serological and molecular techniques for diagnosing canine heartworm infection. Samples were collected between July 2015 and April 2016 from 103 dogs in Cabo Frio, RJ, Brazil. The wet fresh blood, thick smears, thin smears and modified Knott's test were used to detect microfilariae. ELISA (Snap™ 4Dx ® IDEXX) was used to detect antigens and the polymerase chain reaction (PCR) was used to detect DNA and enable sequencing for species differentiation and confirmation. 19.4% of samples were positive according to microscopy. Through PCR, 15.5% of the total were positive. Using ELISA, the positivity rate was 29.1%. Occult heartworm infection was detected in 11.6% of the samples. ELISA sensitivity was shown to be higher than PCR or microscopy (P = 0.001). Sequencing of samples confirmed the presence of Dirofilaria immitis and Acanthocheilonema reconditum . ELISA was more effective for serological diagnosis canine heartworm and should be used in clinical and epidemiological studies.

Resumo A dirofilariose é um problema de saúde para cães e gatos, especialmente nas regiões costeiras tropicais e subtropicais do mundo. Alguns estudos compararam a eficácia das técnicas de diagnóstico usadas para detectar esta parasitose. Portanto, o objetivo deste estudo foi comparar a microscopia óptica (OM), técnicas sorológicas e moleculares para o diagnóstico de infecção por Dirofilaria immitis . Foram coletadas, entre julho de 2015 e abril de 2016, amostras de 103 cães em Cabo Frio, RJ, Brasil. O exame direto, distensão espessa, distensão delgada e o teste de Knott modificado foram usados para detectar microfilárias. O ELISA (Snap ™ 4Dx ® IDEXX) foi usado para detectar antígenos e a reação em cadeia da polimerase (PCR) foi usada para detectar DNA e o sequenciamento para diferenciação e confirmação de espécie. Das amostras, 19,4% foram positivas de acordo com a microscopia. Por PCR, 15,5% do total foram positivos. Utilizando o ELISA, a taxa de positividade foi de 29,1%. Dirofilariose oculta foi detectada em 11,6% das amostras. A sensibilidade ao ELISA mostrou-se superior à PCR ou microscopia (P = 0,001). O sequenciamento das amostras confirmou a presença de Dirofilaria immitis e Acanthocheilonema reconditum . O ELISA foi mais eficaz no diagnóstico sorológico de dirofilariose canina e deve ser usado em estudos clínicos e epidemiológicos.

Toxoplasma gondii molecular and immunological identification and risk factors associated with infection in chicken slaughtered at Triângulo Mineiro region, Minas Gerais, Brazil / Identificação molecular e imunológica de Toxoplasma gondii e fatores de risco associados com infecção em galinhas abatidas na região do Triângulo Mineiro, Minas Gerais, Brasil

This study aimed to determine the occurrence of anti-Toxoplasma gondii antibodies in the serum of slaughtered chickens in the region of Triângulo Mineiro, Minas Gerais, Brazil, to detect the parasite in tissues (heart and brain) of serologically positive chickens, based on molecular analysis, and to investigate risk variables associated with the infection. Sera from 417 chickens raised in extensive, semi-intensive, and intensive production systems were tested by an indirect immunofluorescent antibody test (IFAT) and indirect hemagglutination antibody test (IHA). Polymerase chain reaction (PCR) was performed to detect T. gondii DNA in brain and heart tissues. Antibody anti-T. gondii were found in 37.65% (157/417) of chickens by IFAT, and in 75.06% (313/417) by IHA. The Kappa index showed a weak concordance between the techniques (0.087). Association was observed between seropositivity and the variables, age (p < 0.0001), type of feeding (p < 0.0001) and collective raising with other animal's species (p < 0.0001). Association, based on IFAT, was not observed between seropositivity and the variables, sex (p = 0.0526), presence of cats (p > 0.9999), and presence of rats (p > 0.9999). Presence of parasite DNA was detected in brain samples from two chickens, which were raised in intensive and semi-intensive production systems. The results suggest the meat of these slaughtered animals may serve as a transmission source of this protozoan to humans.(AU)

O objetivo do presente estudo foi determinar a frequência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em soro de galinhas abatidas na região do Triângulo Mineiro, Minas Gerais, detectar molecularmente o parasito em tecidos (coração e cérebro) de algumas das aves sorologicamente positivas e averiguar variáveis de risco associadas à infecção. Foram testados soros de 417 galinhas, criadas nos sistemas extensivo, semi-intensivo e intensivo. Para a pesquisa de anticorpos anti-T. gondii foi utilizada a Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) e Hemaglutinação Indireta (HAI). A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) foi utilizada para detectar o DNA de T. gondii em fragmentos de cérebro e coração. Anticorpos foram detectados no soro de 37,65% (157/417) das aves pela RIFI e em 75,06% (313/417) pela HAI. O índice Kappa mostrou uma fraca concordância entre as técnicas (0,087). Baseado na RIFI, foi verificada associação estatisticamente significativa (p < 0,0001) entre a soropositividade e as variáveis: idade, tipo de alimentação e criação em conjunto com outras espécies animais. Não foi observada associação estatística (p > 0,01) entre as variáveis: sexo, presença de gatos e presença de ratos. Pelo diagnóstico molecular DNA do parasito foi detectado em duas amostras de cérebro, de indivíduos diferentes criados em sistema intensivo e semi-intensivo. Os resultados indicam a possibilidade de a carne dessas aves poderem atuar como fonte de infecção deste protozoário para o homem.(AU)

Potencialidades da Amazônia para a paleoparasitologia / The potentialities of the Amazon for paleoparasitology

Uma falácia científica muitas vezes leva à falta de interesse em estudar determinadas regiões geográficas no que diz respeito a áreas específicas do conhecimento científico. Este é o caso da Paleoparasitologia na região amazônica, que pretendemos desmitificar com esta revisão. Não é incomum encontrarmos afirmações de que na Amazônia seriam raras as possibilidades de recuperação de vestígios orgânicos preservados, o que limitaria o estudo da Paleoparasitologia. Isso pelo fato de a região haver sido habitada no passado por populações pequenas, o que resultaria em pouco material para o estudo, ou em razão dos baixos índices de preservação do material. Porém, isso não é verdade, uma vez que a região apresenta grande potencial de estudo, sobretudo de vestígios ósseos, mas também do solo arqueológico. A pesquisa deste material traria ganho inestimável para a área e poderia elucidar questões acerca da origem de infecções, se no Velho ou Novo Mundo, do caminho percorrido por elas, das datações e explicações para sua entrada nas Américas. A maioria das infecções que poderiam ser pesquisadas continua presente na região e acomete a população local constituindo, em alguns casos, importantes problemas na área da saúde coletiva. É preciso alertar os pesquisadores e moradores da região que têm conhecimento da existência deste material arqueológico sobre o fato de que, com as técnicas atuais, o menor fragmento ou quantidade do material possibilita seu estudo.

Toxoplasmosis-rllated knowledge among pregnant nd postpartum women attended inn public health units in niterói, rio de janeiro, Braill / Conhecimento sobre toxoplasmose entre gestantes e puérperas atendidas na rede pública de saúde do município de Niterói, Rio de Janeiro, Brasil

The present study conducted a toxoplasmosis-related knowledge level survey with 400 pregnant and puerperal women attended in public health units in the municipality of Niterói, Rio de Janeiro. Only 111 (27.8%) women claimed to know about the disease. Most of them (n = 289; 72.2%) had never heard about toxoplasmosis nor knew how to prevent the infection by Toxoplasma gondii. A significant difference (p = 0.013) regarding the presence of anti-T. gondii IgG was observed between women who claimed to know about the disease and those who had never heard about it. These results highlight the importance of a systematic serological screening process for toxoplasmosis, as well as the importance of primary prevention by accurate information during prenatal care, an important Public Health action to be implemented.

Este estudo teve por objetivo realizar um levantamento do conhecimento de 400 gestantes e puérperas atendidas na rede pública de saúde do município de Niterói, Estado do Rio de Janeiro sobre a toxoplasmose. Apenas 111 (27,8%) participantes relataram conhecer a doença. A maioria 289 (72,2%) nunca ouviu falar sobre a toxoplasmose, principalmente sobre as formas de prevenção da infecção pelo Toxoplasma gondii. Foi encontrada diferença significativa entre as pacientes que disseram conhecer a toxoplasmose e aquelas que relataram desconhecer a doença com relação à presença de anticorpos IgG anti- T.gondii (p = 0,013). Estes resultados permitem ressaltar a importância do rastreamento sorológico sistemático na infecção toxoplásmica, bem como a prevenção primária por meio de informações corretas durante o pré-natal, sendo esta uma importante medida de saúde pública a ser implementada.

Lutz's spontaneous sedimentation technique and the paleoparasitological analysis of sambaqui (shell mound) sediments

Parasite findings in sambaquis (shell mounds) are scarce. Although the 121 shell mound samples were previously analysed in our laboratory, we only recently obtained the first positive results. In the sambaqui of Guapi, Rio de Janeiro, Brazil, paleoparasitological analysis was performed on sediment samples collected from various archaeological layers, including the superficial layer as a control. Eggs of Acanthocephala, Ascaridoidea and Heterakoidea were found in the archaeological layers. We applied various techniques and concluded that Lutz's spontaneous sedimentation technique is effective for concentrating parasite eggs in sambaqui soil for microscopic analysis.

Studies on protozoa in ancient remains - A Review

Paleoparasitological research has made important contributions to the understanding of parasite evolution and ecology. Although parasitic protozoa exhibit a worldwide distribution, recovering these organisms from an archaeological context is still exceptional and relies on the availability and distribution of evidence, the ecology of infectious diseases and adequate detection techniques. Here, we present a review of the findings related to protozoa in ancient remains, with an emphasis on their geographical distribution in the past and the methodologies used for their retrieval. The development of more sensitive detection methods has increased the number of identified parasitic species, promising interesting insights from research in the future.

Paleoparasitologic, paleogenetic and paleobotanic analysis of XVIII century coprolites from the church La Concepción in Santa Cruz de Tenerife, Canary Islands, Spain

We present the results of a paleoparasitologic, paleogenetic and paleobotanic analysis of coprolites recovered during the excavation of the church La Concepción in Santa Cruz de Tenerife. Coprolites (n = 4) were rehydrated and a multidisciplinary analysis was conducted. The paleobotanic analysis showed numerous silicates, seeds and fruits of the family Moraceae. In the paleoparasitologic study, Ascaris sp. eggs (n = 344) were identified. The paleogenetic results confirmed the Ascaris sp. infection as well as the European origin of human remains. These findings contribute to our knowledge of ancient helminthes infections and are the first paleoparasitological record of Ascaris sp. infection in Spain.

Molecular paleoparasitological diagnosis of Ascaris sp. from coprolites: new scenery of ascariasis in pre-Colombian South America times

Paleoparasitological studies using microscopy showed that Ascarisand Trichuris trichiura are the human intestinal parasites most found in archaeological sites. However, in pre-Columbian South American archaeological sites, Ascaris is rare. In this work we standardized a molecular methodology for Ascaris diagnosis directly from ancient DNA retrieved from coprolites. Using cythochrome b gene (142 bp) target, ancient DNA sequences were retrieved from South American samples, negative by microscopy. Moreover, the methodology applied was sensitive enough to detect ancient DNA extracted from 30 Ascaris eggs from an European coprolite. These results revealed a new scenery for the paleodistribution of Ascaris in South America.